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肿瘤命脉VEGFA

肿瘤命脉VEGFA

VEGFA(Vascular Endothelial Growth Factor A),属于血小板衍生生长因子 家族,大量分布于人和动物的肾脏、脾脏、肝脏、胰腺、骨骼和大脑等组织中。 VEGFA 可以和 VEGFR1、VEGFR2、Nrp1 以及 Nrp2 受体结合增加血管的通透 性,促进血管内皮细胞的增殖与迁移,减少肿瘤细胞的凋亡,同时对血管支持 物的生成有促进作用。

VEGF-A mRNA 由 8 个外显子和 7 个内含子构成,经交替剪切产生 7 种同 工型,9 种异构体,主要包括以下六种:VEGF-A121、VEGF-A145、VEGF-A165、 VEGF-A183、VEGF-A189和 VEGF-A206,右下角编号代表着各自的氨基酸个数, 其各个的氨基酸序列。不同亚型均具有调节血管的功能,但由于氨基酸序 列的不同导致不同亚型在细胞中的定位以及生物活性不尽相同,它们的生物活 性与硫酸肝素蛋白多糖结合域的表达相关。

VEGF-A165,为碱性蛋白,既可分泌到细胞外也可结合到细胞表面或分泌到细胞 质基质,有硫酸肝素蛋白多糖结合域,具有最佳的生物利用度和生物潜能[1]。 VEGF-A121和 VEGF-A145呈弱酸性,是一种自由分布的蛋白,无硫酸肝素蛋白多 糖结合域,也不和细胞外基质的糖蛋白结合。VEGF-A183、VEGF-A189和 VEGF-A206碱性强于 VEGF-A165,主要分布在细胞外基质中,与肝素有很强的亲 和性。


为了方便研究人员研究 VEGFA 的功能并在体内外检测 VEGFA 的蛋白含 量,开发了一系列 VEGFA 的重组蛋白和抗体以及 ELISA 定量检测试剂盒。VEGFA 相关产品的研发及面市,为广大科研人员提供了系统 的 VEGFA 研究工具体系。

通过分析人VEGFA的重组蛋白分子量及纯度的SDS-PAGE检测。


用 重组蛋白免疫小鼠,并通过亲和层析等方法纯化得到小鼠 抗人 VEGFA 单克隆抗体;免疫家兔获得兔抗人 VEGFA 多克 隆抗体。将 与生物素偶联得到生 物素标记抗体;与 FITC 偶联得到FITC 标记抗体,这两种抗体 不仅能特异性识别 VEGFA,而且带有荧光或生物素标记,可更方便直接对该蛋 白进行体内外检测。这些抗体均已通过 Western Blot 和 IHC 等方法进行过验证。 利用对血清样本进行 WB 检测,结果如图 2 所示。用人肝脏组织 进行 IHC 检测结果展示于图 3 中,结果显示在人肝脏组织中该蛋白主要集中表 达于细胞质中。


在VEGFA蛋白和抗体研发成功的基础上,研发了 VEGFA 检测试剂盒,包括 Elisa 试剂盒以及化学发光试剂 盒。

除了人 VEGFA 的产品外,公司还成功开发了针对大鼠、 小鼠、兔、狗等其它 6 个物种逾 40 种 VEGFA 相关产品,包括蛋白、抗体、生 物素和 FITC 偶联抗体、Elisa 试剂盒、化学发光试剂盒等,这些产品为科研人 员研究不同物种中 VEGFA 的功能以及表达提供了非常完善的技术支持。

此外,为满足研究者对 VEGFA 的某一特定亚型开展研究的需求,也针对 VEGFA 不同的亚型进行了相应产品的开发,包括 VEGF-A121、VEGF-A145、VEGF-A165、VEGF-A183、VEGF-A189和 VEGF-A206 , 其中包括不同物种的蛋白、抗体、生物素和 FITC 偶联抗体、Elisa 试剂盒、化 学发光试剂盒等。在 Elisa 试剂盒研发过程中,公司通过对大 量抗体进行?细筛选,经过严格的交叉反应性检测,得到与其它各亚型均无交 叉反应性的亚型特异


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