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清醒心肌缺血模型的可控冠状动脉狭窄程度清醒心肌缺血模型的可控冠状动脉狭窄程度 清醒心肌缺血模型的可控冠状动脉狭窄程度 刘远春1，宋小文2，杨红3(1内江市第二人民医院麻醉科，四川省内江市641000；2内江市第六人民医院普外科，四川省内江 市641001；3泸州医学院附属医院，四川省泸州市646000) 引用本文：刘远春，宋小文，杨红.清醒心肌缺血模型的可控冠状动脉狭窄程度[J].中国组织工程研究，2016，20(27):4068-4074.DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.2016.27.017ORCID:0000-0002-3981-8948(刘远春) 文章快速阅读： 文题释义： 急性心肌缺血动物模型的制备：方法很多，可概括分为两类，一是冠状动脉夹闭法、微量直流电刺激法、化学灼烧法及冠状动脉局部滴敷药物法；二是闭胸法，通过注射或接种使动物产生相应疾病，包括异物法，如微珠堵塞法和球囊堵塞法及冠状动脉内注射药物诱发冠状动脉痉挛法。 犬心肌缺血模型的构建：在利用犬进行心肌缺血模型制备的时候，可以采用不同的方式。以往有学者利用遇水可膨胀的纤维素环对动物冠状动脉进行处理，获得实验模型。还有学者通过体外可控方式进行心肌缺血模型建立，利用气囊式或液压式梗阻器对动物的冠状动脉分支进行处理，以获得缺血模型。这一方法操作简单，但容易导致缺血区差异性较大问题的出现。 摘要 背景：麻醉是动物实验对动物采取的保护措施，但相应麻醉药物的使用会对实验结果产生不同程度的影响。 目的：分析清醒与麻醉状态下，冠状动脉狭窄心肌缺血模型犬的各项指标差异及治疗效果。 方法：将20只Beagle犬分5组，每组4只，按照完全正交拉丁方安排进行实验，按照不同的步骤进行依次干预，干预步骤包括正常观察(正常对照10min后观察30min)、清醒模型(正常对照后狭窄冠状动脉10min，再观察30min)、清醒治疗(正常对照后狭窄冠状动脉10min，舌下含服50μg/kg硝酸甘油，观察30min)、麻醉模型(对动物进行麻醉，正常对照后狭窄冠状动脉10min，再观察30min)、麻醉治疗(对动物进行麻醉，正常对照后狭窄冠状动脉10min，舌下含服50μg/kg硝酸甘油，观察30min)。记录清醒状态下冠状动脉狭窄后，犬心电、血压、心率和体温水平，以及心肌缺血犬清醒与麻醉状态下的平均动脉压、体温、心率、心电图ST段变化。 观察硝酸甘油对心肌缺血犬清醒与麻醉状态下的治疗效果。 结果与结论：冠状动脉狭窄后，清醒犬心电、血压、心率和体温均发生一定改变，其中心电图ST段出现显著上升情况。心肌缺血模型犬麻醉状态下的血压、心率明显高于清醒状态(P<0.05)，麻醉与清醒状态下犬的心电图ST段均出现明显上升。经硝酸甘油治疗，清醒状态下的心肌缺血模型犬起效较快。说明清醒状态下的心肌缺血模型与临床拟合度更高，可以最大限度减少麻醉等对实验结果产生的影响。关键词： 实验动物；心肺损伤与修复动物模型；冠状动脉狭窄；心肌缺血；犬；麻醉；清醒主题词： 心肌缺血；动物，实验；模型，动物；组织工程。 心血管重塑是多种心血管疾病发生和发展的共同病理基础，也是目前心血管疾病防治的重要靶点[1-2]。为了更好地了解心肌缺血的病理特点、加快药物研发等，可通过构建合理的动物模型进行分析研究。当前，有关心肌缺血动物模型制备方法的研究己取得一定进展[3-5]。基于人道主义的考虑，麻醉是动物保护所必需采取的措施[6]，并于麻醉条件下实施各项检测，了解心肌缺血治疗效果等。但是，相应麻醉药物的使用等会对实验结果产生不同程度的影响，无法为临床治疗等提供可靠的参考依据。清醒状态的动物更加接近其生理状态，实验以犬为实验动物，建立可控冠状动脉狭窄程度的心肌缺血模型，以分析清醒动物模型的应用优势，为动物模型的 制备和应用等提供参考。 1 材料和方法Materialsandmethods 1.1 造模动物及材料 8-12月龄雄性Beagle犬20只， 体质量25kg左右，由扬州四方实验动物科技有限公司提供，许可证号SCKX(苏)2015-0013，均饲养于内江市第二人民医院动物中心。此次研究相关方案均提交内江市第二人民医院医学伦理部门审核并经批准，符合相关伦理学要求。1.2 造模方法 心肌缺血模型的制备[7]：对动物进行戊巴比妥钠麻 醉。无菌条件下打开腹腔，腹壁放置发射装置。 于腹股沟处将皮肤切开，对股动脉进行分离，经皮下将发射装置的动脉插管引至腹股沟处，插入股动脉，用来进行血压测量。气管插管接呼吸机，实施人工正压呼吸。于动物左侧第四肋间进行开胸，暴露心脏之后将心包剪开，对冠状动脉前降支一段血管予以分离，并将乳胶制血管压迫环置于其下。经皮下将发射装置的心电电极引入胸腔，分别固定在心底部和拟缺血心肌表面，测定心外膜心电图。缝合心包，闭合胸腔，经皮下从胸腔将压迫环连接管引至背部肩胛骨之间，用来进行狭窄处理。在动物皮下埋置体温电极，发射装置固定在腹腔壁，常规缝合切口，术后每天给予青霉素以抗感染，并常规喂养，术后第10天拆线。 分组干预：将20只Beagle犬分5组，每组4只，按照 完全正交拉丁方安排进行实验，对5组动物按照不同的步骤进行依次干预，干预方法包括正常观察、清醒模型、清醒治疗、麻醉模型、麻醉治疗，分别在动物清醒与麻醉状态下狭窄冠状动脉，观察硝酸甘油治疗下各项指标的变化[8]。 动物拆线后开始进行实验，实验时将动物置于安装有接收器的特制观察笼中，30min后采样做正常对照，然后在5min内向血管压迫环的连接管中注射生理盐水，以狭窄冠状动脉(狭窄60%左右)。其中，麻醉方法为静脉注射戊巴比妥钠；正常观察指正常对照10min后观察30min；清醒模型表示做正常对照后狭窄冠状动脉10min，再次观察30min；清醒治疗表示正常对照后狭窄冠状动脉10min，舌下含服硝酸甘油50μg/kg，观察 30min；麻醉模型指对动物进行戊巴比妥钠麻醉，采集正常对照数据后冠脉狭窄冠状动脉10min，再观察30min；麻醉治疗指对动物进行戊巴比妥钠麻醉，采集正常对照数据后狭窄冠状动脉10min，舌下含服硝酸甘油50μg/kg，观察30min。1.3 主要观察指标 记录清醒犬冠状动脉狭窄后，心 电图、血压、心率和体温水平，冠状动脉狭窄所致心肌缺血犬清醒与麻醉状态下的平均动脉压、体温、心率、心电图ST段变化，以及硝酸甘油对心肌缺血清醒犬与麻醉犬的治疗效果。1.4 统计学分析 对研究过程中获得的数据进行收 集，使用的统计学软件为SPSS公司的SPSS18.0。计量资料利用_ x±s形式进行表示，并进行方差分析，计算P值，P<0.05为差异存在统计学意义。 2 结果Results 2.1实验动物数量分析 20只犬均进入结果分析。 2.2 清醒犬冠状动脉狭窄后心电、血压、心率和体温 的变化情况 清醒状态下犬冠状动脉狭窄后，心电、血 压、心率和体温均发生一定的改变，其中心电图ST段较之正常状态出现显著上升的情况(P<0.05)，其余指标较之正常状态均无显著差异(P>0.05)，见表1。2.3 冠状动脉狭窄所致心肌缺血犬清醒与麻醉状态下各项指标的比较冠状动脉狭窄后，清醒状态下动物的血压、体温、心率均发生一定的改变，但较之正常值均未出现明显差异(P>0.05)；较之清醒状态，麻醉后动物的血压出现不断上升情况且心率明显加快(P<0.05)；冠脉狭窄60%后10min内，清醒与麻醉状态动物心电图ST段出现明显上升，10min后缓慢下降，两种状态的变化趋势和幅度均基本一致，无明显差异，见表2，图1。2.4 心肌缺血清醒犬与麻醉犬硝酸甘油治疗效果分析经硝酸甘油治疗，两种状态下的ST段变化情况呈现出明显的不同。麻醉组给药后6min，ST段开始出现明显下降，10-15min达到最低，作用维持到给药后20min。清醒组给药后2min，ST段即开始出现明显下降，4-6min左右达到最低，作用维持到给药后20min。对两种状态下的动物进行比较，清醒状态下硝酸甘油可更快地发挥药效。对心肌缺血清醒犬与麻醉犬硝酸甘油治疗效果进行分析，可得处于清醒状态下的模型犬经硝酸甘油治疗，体温未出现明显改变，但心率明显加快，血压明显下降；麻醉状态下，经治疗心率变化不大，血压明显下降，体温明显降低。 这一背景： 麻醉是动物实验对动物采取的保护措施， 但相应麻醉药物的使用会对实验结果产生不同程度的影 响。 目的 ：分析清醒与麻醉状态下，冠状动脉狭窄心肌缺血模型犬的各项指标差异及治疗效果。 方法 ：将 20 只 Beagle 犬分 5 组，每组 4 只，按照完全正交拉丁方安排进行实验，按照不同的步骤进 行依次干预，干预步骤包括正常观察 ( 正常对照 10 min 后观察 30 min) 、清醒模型 ( 正常对照后狭窄冠状 动脉 10 min ，再观察 30 min) 、清醒治疗 ( 正常对照后狭窄冠状动脉 10 min ，舌下含服 50 μg/kg 硝酸甘 油，观察 30 min) 、麻醉模型 ( 对动物进行麻醉，正常对照后狭窄冠状动脉 10 min ，再观察 30 min) 、麻 醉治疗 ( 对动物进行麻醉， 正常对照后狭窄冠状动脉 10 min ， 舌下含服 50 μg/kg 硝酸甘油， 观察 30 min) 。 记录清醒状态下冠状动脉狭窄后， 犬心电、 血压、心率和体温水平， 以及心肌缺血犬清醒与麻醉状态下 的平均动脉压、体温、心率、心电图 ST 段变化，观察硝酸甘油对心肌缺血犬清醒与麻醉状态下的治 疗效果。 结果与结论 ：冠状动脉狭窄后，清醒犬心电、血压、心率和体温均发生一定改变，其中心电图 ST 段出 现显著上升情况。心肌缺血模型犬麻醉状态下的血压、心率明显高于清醒状态 ( P < 0.05) ，麻醉与清醒 状态下犬的心电图 ST 段均出现明显上升。经硝酸甘油治疗，清醒状态下的心肌缺血模型犬起效较快。 说明清醒状态下的心肌缺血模型与临床拟合度更高，可以最大限度减少麻醉等对实验结果产生的影响。 关键词： 实验动物；心肺损伤与修复动物模型；冠状动脉狭窄；心肌缺血；犬；麻醉；清醒 主题词： 心肌缺血；动物，实验；模型，动物；组织工程
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