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细胞复苏时遇到冻存时挖的坑,如何化解?细胞复苏时遇到冻存时挖的坑,如何化解? 实验室偶尔会发生这样的情况: “靠,细胞要死了,赶紧冻掉,不能让细胞死在我手里。” “天呢,细胞培养液都这么黄了,赶紧冻掉。” “妈呀,细胞融合度都逼近100%了,赶紧冻掉。” “咦,细胞好像少了点,算了,就这样吧。” 如果你复苏的细胞就是上面这些人所留下来的,那就要格外注意了。 解决方法: 所谓知己知彼才能百战不殆,在复苏前,一定要先清楚地了解这份细胞的增殖能力。如果增殖能力不高,接种时就要增加细胞接种密度并添加5%~10%的血清。 如果细胞本身数量就非常少,也可以不离心,直接接种培养(加入培养基的体积>5倍的冻存细胞体积)。复苏后3天内尽量少对细胞进行操作,延迟换液时间。 |