细胞培养这些棘手问题应对方法

细胞培养这些棘手问题应对方法

一、冷冻管应如何解冻 ？

取出冷冻管后，须立即放入 37 ℃ 水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在 1 分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管的爆裂。

二、细胞冷冻管解冻培养时，DMSO如何处理？

在细胞解冻之后，可直接离心去除DMSO，用新鲜的培养基悬浮后直接放入含有新鲜培养基的培养角瓶中进行细胞培养，如此可避免解冻后细胞生长受到DMSO影响。

三、可否使用与原先培养条件不同的培养基？

每一细胞株均有其特定使用且已适应的细胞培养基，若骤然使用和原先提供培养条件不同的培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活，不应该马上替换。

四、可否使用与原先培养条件不同的血清种类？

血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。

五、何谓 FBS，FCS，CS，HS？

FBS （fetal bovine serum） 和 FCS （fetal calf serum） 是相同的意思，两者都是指胎牛血清。CS （calf serum） 则是指小牛血清。HS （horseserum） 则是指马血清。

六、培养细胞时应使用 5% 或 10% CO2？

一般培养基中大都使用 HCO3-/CO32-/H+ 作为 pH 的缓冲系统，而培养基中 NaHCO3 的含量将决定细胞培养时应使用的 CO2 浓度。理论当培养基中 NaHCO3 含量为每公升 3.7 g 时，细胞培养时应使用 10% CO2；当培养基中 NaHCO3 为每公升 1.5 g 时，则应使用 5% CO2 培养细胞。