一:用本产品保存新鲜组织样品 1. 估计完全浸没样品所需要本产品的体积(1g 组织需10 mL)。 2. 标记收集管并加入估计所需量的本产品。 3. 以最快速度将样品剪切成厚度小于0.5 cm的碎块。注: 鼠肝、肾和脾等小器官样品和没有蜡质保护层的植物样品可不需剪切而直接放入本产品中保存,有蜡质保护层的植物样品需要先将蜡表皮破坏。 4. 将组织碎块完全浸没于收集管的本产品中。 5. 将收集管存放于温度适当的地方,存放时间不能超过该温度下的最长存放时间,如果要存放在-20℃或-80℃,需先将样品在 4℃放置过夜后再转移到最后的温度。注:将样品转移到-20℃或-80℃前,需要倒弃保护液。常见存放温度与其最长存放时间关系为如下: 保存温度 | 时间及效果 | 37℃ | 一天(保存三天的样品 RNA 有部分降解) | 18-25℃ | 一周(保存两周的样品 RNA 有轻微降解) | 2-8℃ | 一个月 | -20℃和-80℃ | 长期 |
6. 从存放处取出样品 (-20℃或-80℃保存的样品需先在室温下融化),用消过毒的镊子将组织碎块从保护液中取出。 7. 立即开始RNA提取或进行其他处理 (如将样品分割成更小的碎块再重新保存等)。注:样品可以反复冻融二十次而其 RNA 质量不会受到影响。 二:本产品保存培养细胞、悬浮细胞、细菌和RNA病毒 1. 标记收集管。 2. 将待样品转移到离心管中,离心收集细胞,弃上清。注:处理含病毒的样品(如 血浆)可直接从步骤第4步开始。 3. 用冰浴的缓冲液洗一次。 4. 将细胞悬浮在少量缓冲液中。 5. 加入五到十倍体积的本产品,混均; 对病毒样品,加入两到三倍体积的本产品,混均。 6. 将收集管存放于温度适当的地方,存放时间不能超该温度下的最长存放时间。如果要存放在-20℃或-80℃,需先在4℃放置过夜后再转移到最后温度条件(将样品转移到-20℃或-80℃前,需要倒弃保护液)。注:样品存放温度与其最长存放时间关系为如下: 保存温度 | 时间及效果 | 37℃ | 一天(保存三天的样品 RNA 有部分降解) | 18-25℃ | 一周(保存两周的样品 RNA 有轻微降解) | 2-8℃ | 一个月 | -20℃和-80℃ | 长期 |
7. 取出样品,室温下融化(-20℃或-80℃保存的样品需先在室温下融化)。 8. 加入一倍体积的预冷的缓冲液 (如PBS),用常规离心法收集细胞并用缓冲液 洗一次。病毒样品可免去此步骤。 9. 细胞直接用于RNA的提取或其他处理。 |