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四大绝招-帮你选择优质的ELISA试剂盒

来源:试剂酶联网作者:试剂酶联网网址:www.shjgogo.com

ELISA试剂盒在实验室已经相当普及,绝大多数ELISA试剂盒都是用于检测未知样本中抗原的浓度。用试剂盒当然比自己慢慢摸条件快得多,ELISA试剂盒不仅可以让实验更便利,往往还更加精确。现在市面上的ELISA试剂盒既有国产也有进口,数量繁多令人目不暇接,怎样才能选出最适用的产品呢?首先当然得根据我们所要检测的分子进行检测,除此以外也还有一些需要加以考量的因素。
1. 抗体类型
单克隆抗体和多克隆抗体都能够用于ELISA,实际上有时候二者结合效果更好。例如,对于双抗夹心法而言,用多抗进行捕获而单抗进行检测有时更有帮助。多抗能够确保捕获所有抗原,随后单抗再特异性检测拥有特定抗原表位的抗原。
双抗夹心法ELISA中捕获抗体与检测抗体(不论多抗还是单抗)的配对很有讲究。我们不希望捕获抗体与检测抗体竞争抗原上的同一位点,为此我们就需要确保捕获抗体和检测抗体所识别的抗原表位不存在重叠。如果捕获抗体和检测抗体之间发生了冲突,就会对实验结果产生较大影响。要避免这一问题,我们可以选择购买“matched pair”的捕获/检测抗体对,这些打包在一起的抗体是商家经过验证才推荐的好组合。
2. 实验类型
ELISA试剂盒有多种类型,不过它们都有一个共同特点,就是进行抗原捕获。一般捕获形式包括将抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗体进行捕获。In-cell ELISA和酶联免疫斑点ELISPOT是两种特殊的类型,In-cell ELISA需要将微孔板中培养的细胞进行固定和通透化,然后再用抗体原位检测。ELISPOT有点像蛋白印迹Western blot,先在带膜的微孔板中培养细胞,然后在膜上检测细胞分泌的抗原形成斑点。此外,我们还需要根据自身需要选择96孔板或是384孔板进行ELISA实验。
通常人们使用双抗夹心法进行ELISA实验,双抗夹心法中抗原被夹在捕获抗体和检测抗体之间,这种方法既灵敏又有效,受到了许多研究者的青睐。不过有时候双抗夹心法并不是最佳选择,例如有时候抗原特别小让两个大抗体难以附着,又或者抗体只有一个抗体结合位点。在上述情况下,竞争性ELISA就更为适用,这种方法是采用带标记的纯化抗原与样本中无标记的抗原进行竞争,以结合捕获抗体。
3. 检测方式
如今检测ELISA有许多途径,我们可以根据自己的偏好进行选择。一般ELISA检测的是酶促反应的可溶性产物,抗体上结合有相应的酶(例如通常使用的辣根过氧化物酶HRP),而反应体系中添加有相应的底物(如3,3-二氨基联苯胺DAB)。这种酶促反应生成具有特征性的颜色,可以通过分光光度计进行检测,碱性磷酸酶AP也是一种常用酶。酶可以结合在一抗上,也可以结合在二抗上,还可以使用链霉亲和素标记的酶与亲和素标记的一抗结合。此外ELISA的结果检测还包括放射性检测、荧光检测、化学发光或显色法检测等。
4. 交叉反应
如果抗体间发生冲突或交叉反应就会影响整个实验的特异性。其中抗体来源所带来的兼容性就是交叉反应的一个因素。尽管现在购买源自指定动物的抗体越来越容易,我们仍有必要确认一下是否会产生交叉反应的问题。在用双抗夹心法进行ELISA检测时,检测用的二抗必须特异性针对检测一抗,而不能与捕获抗体起反应。如果检测用二抗与捕获抗体结合,实验特异性就会大打折扣。通常我们选用源自不同宿主的捕获抗体和检测一抗,来避免上述问题。
与此同时,了解试剂盒中提供的buffer也是有必要的(例如washing buffer和blocking buffer),以免这些buffer含有可能影响抗原抗体相互作用的组分,使检测结果收到影响。

GS-E10995   人腺苷脱氨酶(ADA)ELISA试剂盒    

GS-E10996   人透明质酸酶(HAase)ELISA试剂盒    

GS-E10997   人天门冬氨酸氨基转移酶(AST)ELISA试剂盒    

GS-E10998   人酸性磷酸酶(ACP)ELISA试剂盒    

GS-E10999   人葡萄糖6磷酸异构酶(GPI)ELISA试剂盒    

GS-E11000   人磷酸葡萄糖变位酶(PGM)ELISA试剂盒    

GS-E11001   人亮氨酰氨基肽酶(LAP)ELISA试剂盒    

GS-E11002   人链激酶(SK)ELISA试剂盒    

GS-E11003   人核糖核酸酶(RNASE)ELISA试剂盒    

GS-E11004   人过氧化脂质/乳过氧化物酶(LPO)ELISA试剂盒    

GS-E11005   人芳基硫酸酯酶A(ASA)ELISA试剂盒    

GS-E11006   人对氧磷酶(PON)ELISA试剂盒    

GS-E11007   人丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒    

GS-E11008   人半乳糖6硫酸酯酶(Gal-6S)ELISA试剂盒    

GS-E11009   人艾杜糖硫酸酯酶(IDS)ELISA试剂盒    

GS-E11010   人β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA试剂盒    

GS-E11011   人β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA试剂盒    

GS-E11012   人β内酰胺酶(β-lactamase)ELISA试剂盒    

GS-E11013   人β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA试剂盒    

GS-E11014   人β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA试剂盒    

GS-E11016   人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA试剂盒    

GS-E11017   人α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒    

GS-E11018   人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA试剂盒  

GS-E11019   人L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA试剂盒    

GS-E11020   人5核苷酸酶(5-NT)ELISA试剂盒    

GS-E11021   人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA试剂盒  

GS-E11022   人肌酸激酶(CK)ELISA试剂盒    

GS-E11023   人靶向核糖核酸酶(TR)ELISA试剂盒  

GS-E11024   人蛋白激酶C(PKC)ELISA试剂盒  

GS-E11025   人醛缩酶(ALD)ELISA试剂盒  

GS-E11026   人L-乳酸脱氢酶(L-LDH)ELISA试剂盒  

GS-E11027   人酸性神经鞘磷脂酶(ASM)ELISA试剂盒  

GS-E11028   人花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)ELISA试剂盒  

GS-E11029   人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA试剂盒  

GS-E11030   人腺苷酸环化酶1(AC-1)ELISA试剂盒    

GS-E11031   人可溶性腺苷酸环化酶(sAC)ELISA试剂盒  

GS-E11032   人鸟氨酸脱羧酶(ODC)ELISA试剂盒  

GS-E11033   人蛋白酪氨酸激酶(PTK/CD115)ELISA试剂盒  

GS-E11034   人蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP/PTPase/CD148)ELISA试剂盒  

GS-E11035   人肿瘤坏死因子α转化酶(TACE)ELISA试剂盒  

GS-E11036   人多形核白细胞弹性蛋白酶(PMN Elastase)ELISA试剂盒  

GS-E11037   人尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA/PLAU)ELISA试剂盒  

GS-E11038   人激肽释放酶8(KLK 8)ELISA试剂盒    

GS-E11039   人激肽释放酶6(KLK 6)ELISA试剂盒    

GS-E11040   人果糖1,6二磷酸醛缩酶(FDA)ELISA试剂盒  

GS-E11041   人组织蛋白酶D(cath-D)ELISA试剂盒    

GS-E11042   人激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA试剂盒    

GS-E11043   人胰激肽原酶(PK)ELISA试剂盒    

GS-E11044   人乌头酸酶2(ACO-2)ELISA试剂盒    

GS-E11045   人26S蛋白酶体(26S PSM)ELISA试剂盒    

GS-E11046   人周期素依赖性激酶4(CDK-4)ELISA试剂盒    

GS-E11048   人胎盘碱性磷酸酶(PLAP)ELISA试剂盒    

GS-E11049   人受体酪氨酸激酶(RTKs)ELISA试剂盒    

GS-E11050   人丝裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)ELISA试剂盒    

GS-E11051   人溶菌酶(LZM)ELISA试剂盒    

GS-E11052   人黏着斑激酶(FAK)ELISA试剂盒  

GS-E11053   人可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)ELISA试剂盒  

GS-E11054   人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA试剂盒  

GS-E11056   人精氨酸酶(Arg)ELISA试剂盒  

GS-E11057   人中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)ELISA试剂盒  

GS-E11058   人间变性淋巴瘤激酶(ALK)ELISA试剂盒  

GS-E11059   人激动异构酶/细胞分裂素MB(CKMB)ELISA试剂盒  

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