大鼠层粘连蛋白(LN)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠层粘连蛋白(LN)水平。用纯化的大鼠层粘连蛋白(LN)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入大鼠层粘连蛋白(LN)，再与HRP标记的大鼠层粘连蛋白(LN)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠层粘连蛋白(LN)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠层粘连蛋白(LN)浓度。

试剂盒组成

1	30倍浓缩洗涤液	20ml×1瓶	7	终止液 6ml×1瓶
2	酶标试剂	6ml×1瓶	8	标准品(240 ng/L) 0.5ml×1瓶
3	酶标包被板	12孔×8条	9	标准品稀释液 1.5ml×1瓶
4	样品稀释液	6ml×1瓶	10	说明书 1份
5	显色剂A液	6ml×1瓶	11	封板膜 2张
6	显色剂B液	6ml×1/瓶	12	密封袋 1个

标本要求

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

1. 标准品的稀释：提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

60μg/L	5号标准品	150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
30μg/L	4号标准品	150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
15μg/L	3号标准品	150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
7.5μg/L	2号标准品	150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
3.75μg/L	1号标准品	150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450大鼠层粘连蛋白(LN)ELISA试剂盒nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

计算

以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

注意事项

1．从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

保存条件及有效期

1．大鼠层粘连蛋白(LN)ELISA试剂盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6个月

xyJ675Hu人肾上腺髓质素2(ADM2)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Adrenomedullin 2 (ADM2)

xyJ737Hu人白介素21受体(IL21R)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Interleukin 21 Receptor (IL21R)

xyJ738Hu人LIM和SH3蛋白1(LASP1)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for LIM And SH3 Protein 1 (LASP1)

xyJ794Hu人泛醌NADH脱氢酶Fe-S蛋白1(NDUFS1)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for NADH Dehydrogenase Ubiquinone Fe-S Protein 1

(NDUFS1)

xyC258Hu人输出蛋白1(XPO1)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Exportin 1 (XPO1)

xyE592Hu人泛素A52残留核糖体蛋白融合产物1(UBA52)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Ubiquitin A 52 Residue Ribosomal

Protein Fusion Product 1 (UBA52)

AEK507Hu人肌球蛋白重链自身抗体(MYHA)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Myosin Heavy Chain Autoantibody (MYHA)

AEK508Hu人腺嘌呤核苷酸转位因子自身抗体(ANTA)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Adenine Nucleotide Translocator Autoantibody

(ANTA)

xyQ266Hu人EGF样重复盘状结构I样域蛋白3(EDIL3)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for EGF Like Repeats And Discoidin I Like Domains

Protein 3 (EDIL3)

xyC710Hu人Paralemmin蛋白(PALM)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Paralemmin (PALM)

xyF562Hu人囊泡关联膜蛋白2(VAMP2)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Vesicle Associated Membrane Protein 2 (VAMP2)

AEA539Hu人抗髓鞘碱性蛋白抗体(Anti-MBP)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Anti-Myelin Basic Protein Antibody (Anti-MBP)

xyJ169Hu人延伸因子极长链脂肪酸样蛋白1(ELOVL1)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Elongation Of Very Long Chain Fatty

Acids Like Protein 1 (ELOVL1)

xyF360Hu人Cullin 9蛋白(CUL9)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Cullin 9 (CUL9)

xyE904Hu人组蛋白脱乙酰基酶4(HDAC4)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Histone Deacetylase 4 (HDAC4)

xyL822Hu人含WW域转录调节蛋白1(WWTR1)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for WW Domain Containing Transcription Regulator Protein 1

(WWTR1)

xyE798Hu人核受体共激活因子3(NCOA3)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Nuclear Receptor Coactivator 3 (NCOA3)

xyG932Hu人UDP葡萄糖醛酸转移酶2家族多肽B7(UGT2B7)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for UDP Glucuronosyltransferase 2 Family,

Polypeptide B7 (UGT2B7)

xyE375Hu人Lemur酪氨酸激酶3(LMTK3)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Lemur Tyrosine Kinase 3 (LMTK3)

xyH018Hu人转酮醇酶样蛋白1(TKTL1)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Transketolase Like Protein 1 (TKTL1)

xyF846Hu人转化受体电位阳离子通道亚家族C成员6(TRPC6)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Transient Receptor Potential Cation