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产品详情 产品评论(0) 一管式点突变试剂盒 一管式点突变试剂盒产品及特点基因的定点突变是重要的分子生物学技术，广泛用于载体构建、基因改造、蛋 白质功能研究等领域。但传统的方法需要使用单链DNA模板，而得到单链DNA模板 又需要先将基因克隆到类似M13这种载体中，操作过程冗长。为了克服这些缺点， 本公司将突变位点设计到一对互补的引物中，用高保真DNA聚合酶扩增质粒模板， 然后用Dpn I去除原始的甲基化模板，新合成的DNA通过互补形成带切口的双链质 粒，直接用于转化感受态细菌。 本产品具有下列特点： 1. 直接使用质粒DNA作为模板，免去了制备单链DNA的步骤。 2. 基于高保真PCR，对模板DNA序列没特殊要求，可以用于突变任何序列。同时 对模板的需求量很少。 3. 一管式，全部在一个优化的缓冲体系中完成，非常简单。 4. 使用Dpn I去除未突变模板，突变效率高达90%。 5. 不需要连接步骤，反应结束后可以直接转化。 6. 提供阳性对照质粒pUC19和突变引物，便于分析失败原因。 7. 可用于制备点突变，缺失突变和插入突变。 8. 使用于从dam+细菌中纯化的质粒（常用的宿主菌都是dam+），由于JM110 和SCS110为dam-，所以从中提取的质粒不能用本产品制备突变。 一管式点突变试剂盒使用及效果 将5-50 ng甲基化的模板质粒DNA用重叠引物扩增16-18次，然后加入1 μL Dpn I，37℃保温一小时去除残留的甲基化的模板DNA，然后直接转化感受态细胞。 |
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