试剂酶联网
搜索
产品详情
斑马鱼免疫球蛋白样EGF样域酪氨酸激酶1(Tie1)检测试剂盒 
斑马鱼免疫球蛋白样EGF样域酪氨酸激酶1(Tie1)检测试剂盒
类型 : 马ELISA试剂盒
规格 : 96T/48T
提供进口报关单 : 提供
提供正式发票 : 提供
提供合同协议 : 提供
价格 :
0.00
别称 : 免疫球蛋白样EGF样域酪氨酸激酶1测试剂盒
别称2 : Tie1测试剂盒
产品详情
产品评论(0)

斑马鱼免疫球蛋白样EGF样域酪氨酸激酶1(Tie1)检测试剂盒

ELISA Kit for Tyrosine Kinase With Immunoglobulin Like And EGF Like Domains Protein 1 (Tie1)

编号:XY-125

斑马鱼免疫球蛋白样EGF样域酪氨酸激酶1(Tie1)检测试剂盒试验原理

英文名称:ELISA Kit for Tyrosine Kinase With Immunoglobulin Like And EGF Like Domains Protein 1 (Tie1)

本试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA.已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物AB,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中指标的浓度呈比例关系。

试剂盒内容及其配制:

试剂盒成份

96孔配置

48孔配置

96/48人份酶标板

1块板(96T

半块(48T

塑料膜板盖

1

半块

标准品:800pg/ml

1瓶(1.0ml

1瓶(0.5ml

空白对照

1瓶(1.0ml

1瓶(0.5ml

标准品稀释缓冲液

1瓶(8.0ml

1瓶(4.0ml

生物素标记的抗IL-6抗体

1瓶(8.0ml

1瓶(4.0ml

亲和链酶素-HRP

1瓶(12ml

1瓶(6.0ml

洗涤缓冲液

1瓶(20ml

1瓶(10ml

底物A

1瓶(6.0ml

1瓶(3.0ml

底物B

1瓶(6.0ml

1瓶(3.0ml

终止液

1瓶(6.0ml

1瓶(3.0ml

自备材料:

1  蒸馏水。

2  加样器:5ul10ul50ul100ul200500ul1000ul

3  振荡器及磁力搅拌器等。

斑马鱼免疫球蛋白样EGF样域酪氨酸激酶1(Tie1)检测试剂盒样品收集、处理及保存方法:

1  血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2  血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3  细胞上清液---1000×g离心10分钟除颗粒和聚合物。

4  组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液

5  保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

操作注意事项:

l       试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

l       实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

l       不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

l       使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物AB液时,避免使用带金属部分的加样器。

l       使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

l       底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

l       加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

斑马鱼免疫球蛋白样EGF样域酪氨酸激酶1(Tie1)检测试剂盒安全性:

1  避免直接接触终止液和底物AB。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。

2  实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3  不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

试剂盒性能:

1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990

2. 特异性:不与其它细胞因子反应。

3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%

斑马鱼免疫球蛋白样EGF样域酪氨酸激酶1(Tie1)检测试剂盒操作步骤:

1  使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。

2  根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。

3  加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37温育45分钟。

4  甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

5  每孔加入100ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37温育30分钟。

6  甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

7  每孔加入底物AB50ul,轻轻振荡混匀,37温育5分钟。避免光照。

8  取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。

9  450nm波长处测定各孔的OD值。

斑马鱼免疫球蛋白样EGF样域酪氨酸激酶1(Tie1)检测试剂盒结 果 判 断 与分析:

1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD

2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的指标标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度,再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。


联系我们
 工作时间
周一至周五 :8:30-17:30
周六至周日 :9:00-17:00
 联系方式
手机①:15221858802
手机②:13816899465
电话①:021-60526354
电话②:021-60345312
电话③:021-60345367
邮箱①:shxysw01@163.com
邮箱②:shxysw02@163.com
邮箱③:shxysw02@126.com
传真:86-021-37680378
地址:上海市松江区卖新公路2077号3楼8306室(新九广场)
在线客服
 
 
 联系方式
陈军:021-60526354
小余:021-60345312
小吴:021-60345367